Plataforma de citometria de flux
GINYS-IDIBELL-005
José Miguel Andrés Vaquero
Cap de plataforma
Institut d’Investigació Biomèdica de Bellvitge – IDIBELL Serveis Cientificotecnics – 2ª planta Hosptial Duran i Reynals
Gran Via de l’Hospitalet, 199 08908 L’Hospitalet de Llobregat (Barcelona)
La nostra plataforma de citometria de flux proporciona als usuaris equipament d'última generació per a les anàlisis de citometria de flux i la classificació de cèl·lules en alta velocitat. El personal de la unitat dona suport als usuaris en el disseny experimental, l'anàlisi i l'adquisició de dades.
Seguint les instruccions de fabricant, els equips se sotmeten rutinàriament a un manteniment adequat i es duen a terme procediments de control de qualitat estàndard per garantir els millors resultats.
Serveis
Serveis:
- Adquisició de mostres a l’analitzador, ja sigui amb suport tècnic o sense, després de rebre una formació adequada.
- Classificació cel·lular amb suport tècnic.
- Suport per a l’anàlisi de dades si és necessari.
L’objectiu de la Unitat de Citometria és preparar-se i centrar-se en les aplicacions d’interès dels nostres usuaris. Les aplicacions més comuns que s’executen habitualment són:
Classificació cel·lular:
- En mode de purificació (quan el més important és obtenir una alta puresa de la població cel·lular d’interès de la mostra original). Fins a 4 poblacions de cèl·lules al mateix temps (classificació de 4 vies).
- En mode enriquit (quan el més important és obtenir una alta recuperació de la població cel·lular d’interès de la mostra original). De manera que la puresa es veu lleugerament compromesa. També disponible en classificació de 4 direccions.
- En deposició d’una sola cèl·lula (per obtenir una sola cèl·lula o qualsevol nombre desitjat de cèl·lula dins d’un sol pouet utilitzant qualsevol de les plaques estàndard de múltiples orificis).
- En mode mixt (el mode de purificació i enriquiment s’executen simultàniament fins i tot per a 2 poblacions de cèl·lules alhora).
Anàlisi:
- Caracterització per inmunofenotipado multicolor.
- Assaigs de viabilitat.
- Assaigs de cicle cel·lular i proliferació.
- Expressió gènica (anàlisi de proteïnes fluorescents).
- Etc ..
.
Equipament
La unidad està equipada amb 4 citòmetres de flux de la companyia Beckman
Coulter:
Coulter:
·
1x classificador de cèl·lules
CytoFLEX SRT:
1x classificador de cèl·lules
CytoFLEX SRT:
4 làsers (B-R-V-Y), 15 colors (2 + 3 + 5 + 5)
·
1x classificador de cèl·lules
d’alta velocitat Moflo-XDP:
1x classificador de cèl·lules
d’alta velocitat Moflo-XDP:
4 làsers (B-R-V-Y), 11 colors (5 + 2 + 2 + 2) o (5 + 2 + 4)
(Instal·lat l’any 2006).
·
2x
Analitzadors Gallios: 3 làsers
(B-R-V), 10 colors (5 + 3 + 2)
(Instal·lats l’any 2009).
2x
Analitzadors Gallios: 3 làsers
(B-R-V), 10 colors (5 + 3 + 2)
(Instal·lats l’any 2009).
Abreviatures de làser i configuració del banc òptic:
Làsers:
V: violeta, 405 nm / B:blau,
488 nm / Y: groc, 561 nm / R:
vermell, 635 nm.
488 nm / Y: groc, 561 nm / R:
vermell, 635 nm.
Configuració de banc òptic:
10C [2 + 5 + 3] = 10 colors o detectors PMT en total i [nombre d’ells vinculats
a una línia de làser específica).
Publicacions
Molecular markers of putative spermatogonial stem cells in the domestic cat
Reprod Domest Anim Nov6
Reprod Domest Anim Nov6
Direct Conversion of Fibroblasts to Megakaryocyte Progenitors
Cell Rep 17(3):671-683.
Cell Rep 17(3):671-683.
Neuronopathic Gaucher's Disease: induced pluripotent stem cells for disease modelling and testing chaperone activity of small compound
Hum Mol Genet 22 (4): 633-45. Epub 2012 Oct 31.
Hum Mol Genet 22 (4): 633-45. Epub 2012 Oct 31.
Isolation and in vitro culture of primary cardiomyocytes from adult zebrafish hearts
Nat Protoc 8(4): 800-9.
Nat Protoc 8(4): 800-9.
Mcad-mediated intercellular interactions activate satellite cell division
J Cell Sci 126 (Pt 22):5116-31. Epub 2013 Sep 17.
J Cell Sci 126 (Pt 22):5116-31. Epub 2013 Sep 17.
AnnaFrances8/JOIN-Software-v1: Microscopy image processing program. (Version v1).
Anna Francès-Abellán. (2023). AnnaFrances8/JOIN-Software-v1: Microscopy image processing program. (Version v1). Zenodo. https://doi.org/10.5281/zenodo.8370192
Anna Francès-Abellán. (2023). AnnaFrances8/JOIN-Software-v1: Microscopy image processing program. (Version v1). Zenodo. https://doi.org/10.5281/zenodo.8370192
