SLN - Unidad de microscopía de super resolución y nanoscopía
GINYS-ICFO-001
Dr. Pablo Loza-Alvarez
Jefe de la SLN
La Super-resolution Light Microscopy & Nanoscopy (SLN)
Research Facility en ICFO está equipada con técnicas de microscopía punteras
que son capaces de operar un paso más allá que el de los equipos comerciales
más avanzados.
El equipo de investigación de la SLN realiza investigación y
desarrollo continuado en la mayoría de técnicas de microscopía óptica avanzadas
y proporciona acceso y formación a todo tipo de usuarios de la microscopía en
las aplicaciones biomédicas más demandantes. La SLN está abierta a
colaboraciones externas con la industria, hospitales, centros de investigación
y universidades.
La SLN proporciona:
Acceso a colaboradores e investigadores externos a las
diversas técnicas
de la microscopía avanzada
y de súper-resolución.
Formación por medio de cursos prácticos de corta o mediana
duración, adaptados a las necesidades específicas de cada usuario teniendo en
cuenta sus conocimientos básicos.
Herramientas de análisis de imagen y cuantificación
adaptadas a cada una de les técnicas.
Servicios
La SLN ofrece:
-
- Stimulated emisión depletion microscopy (STED): Nuestro sistema STED tiene capacidad para realizar imágenes 3D de superresolución en hasta 3 bandas ópticas (hasta 3 láseres de depleción). El detector de molécula individual (SMD HyD) proporciona una alta eficiencia de detección. Los escáneres resonantes ofrecen altas capacidades de escaneo a velocidades de vídeo de 512×512 pixeles. El sistema incluye una fuente de luz blanca y un laser de semiconductor de 405nm.Técnicas: STED 3D and 3 colours, Confocal, FLIM, Full-hyper spectral (6D) laser scanning confocal, tau-STED, RESCUE, DYMIN, MINFIELD, easy3D.
-
- Microscopia multimodal: Nuestra plataforma de trabajo está construida sobre un microscopio confocal Nikon C1-Si. Este sistema contiene un sistema adicional de escaneo y un torreta doble de filtros de donde está acoplado un láser de Ti:Sapphire de pulsos de femtosegundos (MIRA 900F). Esto permite la implementación simultanea de técnicas de imagen multifotón como: TPEF, SHG/PSHG, THG, así como la posibilidad de realizar cirugía laser o pinzas ópticas.Técnicas: confocal, confocal hiperespectral, TPEF, 3PEF, SHG, PSHG, THG, nano cirugía y pinzas ópticas.
-
- Micro-espectroscopía Raman: Nuestro micro-espectroscopio Raman incluye dos excitaciones láser: 785nm y 532nm. El sistema está totalmente automatizado y permite cambiar la luz de excitación y ajustar la potencia del láser mediante el software Wire. El sistema incluye la capacidad de auto-alineación y de imagen rápida (Streamline).Técnicas: Espectroscopía Raman, Surface Enhanced Raman Spectroscopy (SERS).
-
- Microscopía de hoja de luz (LSFM): Nuestros sistemas LSFM son de microscopios de construcción propia diseñados para explorar muestras grandes 3D como organoides o pequeños embriones. Ellos son muy versátiles y pueden ser usados para abordar diversas cuestiones biológicas gracias a su configuración modular. Pueden ser configurados para trabajar con haces de luz Gaussianos y Bessel en el régimen linear y no-linear. Con nuestros sistemas se puede conseguir imágenes volumétricas de hasta 50 vols/s.Técnicas: TPEF, Microscopía de hoja de luz mediante escaneo digital (DLSM), Escaneo de línea confocal, adquisición volumétrica rápida, clarificación óptica, adquisición de alto rendimiento, ultramicroscpía.
-
- Stochastic optical reconstruction microscopy: Nuestro Sistema STORM está basado en una configuración TIRF con 4 láseres. La estabilidad de la posición de foco está dada por el Perfect Focus System y es totalmente monitorizado. Adquisiciones de la localización multicolor de moléculas individuales se pueden obtener usando la alta sensibilidad de la EMCCD y la localización 3D se obtiene introduciendo una lente cilíndrica.Técnicas: STORM, PALM, SPT, dSTORM.
Equipos
Leica TCS SP8 STED 3X
Objetivos de microscopio:
10x, 63x and 100x
Longitudes de onda de excitación:
Longitudes de onda de excitación:
Láser blanco: 470-670 nm
Semiconductor: 405 nm
Hasta 8 líneas de excitación simultáneas
Láseres STED:
592nm, 660nm, 775nm
Detectores:
Módulo de detección espectral
2 HyD’s reflexión/fluorescencia
2 PMT’s reflexión/fluorescencia
1 PMT transmisión
Sistema de escaneo:
Galvanométrico
Resonante
Leica TCS SP5 STED CW
Objetivos de microscopio:
10x, 20x, 40x, 63x and 100x
Longitudes de onda de excitación:
Láser Argón: 458, 476, 488, 496, 514 nm
Láser HeNe: 543, 633 nm
Láser Ti:zafiro: 750-850nm, durada polsos: 120fs, freqüència de repetició 76MHz
Láseres STED:
592nm CW
Detectores:
Módulo de detección espectral
2 HyD’s reflexión/fluorescencia
3 PMT’s reflexión/fluorescencia
2 APD’s reflexión/fluorescencia
1 PMT transmisión
Sistema de escaneo:
Galvanométrico
Resonante
Abberior Infinity
Objetivos de microscopio:
60x, WD: 0.15 mm, NA=1.42 oli
10x, NA 0.4 aire
40x, WD: 0,18 mm, NA=0.95, aire, anillo de corrección de cubre objetos
60x Aciete de silicona, WD: 0.3 mm, NA=1.3, anillo de corrección de cubre objetos
40X, WD: 0.15 mm, NA=1.3 aceite
60x, WD: 0.28 mm, NA = 1.2 agua
Longitudes de onda de excitación:
Láser 405 nm (cw)
Láser 485 nm (pulsado, picosegundo)
Láser 518 nm, (pulsado, picosegundo)
Láser 561 nm (pulsado, picosegundo)
Láser 640 nm (pulsado)
Láseres STED:
775nm (alta potencia), 595nm
Detectores:
Módulo de detección espectral
2 módulos APD detección de fotón único
2 módulos APD detección de fotón único optimizado para FLIM
Matriz de detectores APD
1 PMT transmisión
Sistema de escaneo:
QUAD Beam Scanner: 4 escàners galvanométricos i 4 servo controladores galvanométricos
Nikon Confocal C1-Si
Objetivos de microscopio:
Para confocal/multifotón: 2x, 10x, 20x, 40x, 60x i 100x
Especiales per multifotón (inmersión en agua): Olympus 25x , 1.05 NA i Nikon 25x, 1.10 NA
Longitudes de onda de excitación:
Láser Argón: 457, 477, 488, 514nm
Láser de Diodo 405, 561, 635nm
Láser Ti:zafiro 750-850nm
Láser de fibra pulsado de Femtosegundo, 1550nm
OPO: 1650nm-1750nm
Detectores:
1 PMT de Transmisión, Fotodiodo IR de gran superficie, Fotodiodo Visible
2 PMT’s reflexión/fluorescencia
2 PMT’s reflexión/fluorescencia i 32 fila de detectores espectrales
Sistema de escaneo:
Galvanométrico
Renishaw InVia Raman micro-espectròmetre
Objetivos de microscopio:
5x, 20x larga distancia de trabajo, 20x, 50x i 100x
Longitudes de onda de excitación:
785nm 300mW
532nm 100mW
Light Sheet Fluorescence Microscopes (4 sistemes diferents)
Objetivos de microscopio:
Excitación: 10X, 0.3 NA and 10X, 0.45 NA
Detección (inmersión en agua): 20X, 0.5 NA and 25X, 1.05 NA
Longitudes de onda de excitación:
Láseres de Diodo 405nm, 488nm, 638nm
Láser DPSS 532nm, 651nm
Láser Ti:Sapphire 750-850nm
Láser Femtosegundo de fibra 1030nm
Detectores:
Cámara: Hamamatsu Orca R2
Cámara: Hamamatsu Orca Flash 4
Nikon N-STORM microscope
Objetivos de microscopio:
10x, 40x, 60x and 100x
Longitudes de onda de excitación:
405, 488, 561, 647 nm
Detectores
Cámara: EMCCD IXON 897
Personal
Dr. Jordi Andilla | jordi.andilla@icfo.eu
| 93 553 4038 - 93 553 4068 - 93 554 2259 | ORCID
| Página PRC
Dr. Mónica Marro Sánchez | monica.marro@icfo.eu
| 93 553 4038 - 93 553 4068 - 93 554 2259 | ORCID
| Página PRC
Proyectos
Título:
Una plataforma de imágenes biomiméticas multiplexadas para evaluar la plasticidad de una sola célula (Plastomics) y la puntuación de la malignidad tumoral
Referencia:
https://cordis.europa.eu/project/id/101046620
Organismo financiador:
EU EIC
Estado:
Activo
Título:
Herramienta de imagen láser fotónica multimodal avanzada para diagnóstico urotelial y endoscopia
Referencia:
https://www.amplitude-imaging.com/
Organismo financiador:
H2020 EU
Estado:
Activo
Título:
Tecnología de implante retinal adaptativo para la restauración de la visión (iVISION)
Organismo financiador:
Fundacio La Caixa (CaixaResearch)
Estado:
Activo
Publicaciones
Few-cycle all-fiber supercontinuum laser for ultrabroadband multimodal nonlinear microscopy
Optics Express Vol. 30, Issue 16, pp. 29044-29062 (2022). https://doi.org/10.1364/OE.454726
Optics Express Vol. 30, Issue 16, pp. 29044-29062 (2022). https://doi.org/10.1364/OE.454726
Focus variation due to near infrared laser in a confocal microscope
Microscopy Research & Technique, Volume85, Issue10 October 2022 Pages 3431-3438
Microscopy Research & Technique, Volume85, Issue10 October 2022 Pages 3431-3438
Multi-modal and multi-scale clinical retinal imaging system with pupil and retinal tracking
Sci Rep 12, 9577 (2022)
Sci Rep 12, 9577 (2022)
Hippocampal Neuronal Cultures to Detect and Study New Pathogenic Antibodies Involved in Autoimmune Encephalitis
JoVE, 184, e63829 (2022)
JoVE, 184, e63829 (2022)
Deficiency of the ywhaz gene, involved in neurodevelopmental disorders, alters brain activity and behaviour in zebrafish
Mol. Psychiatry, 1-10 (2022)
Mol. Psychiatry, 1-10 (2022)
Multiple asters organize the yolk microtubule network during dclk2-GFP zebrafish epiboly
Sci Rep 12, 4072 (2022). https://doi.org/10.1038/s41598-022-07747-7
Sci Rep 12, 4072 (2022). https://doi.org/10.1038/s41598-022-07747-7
Human CASPR2 antibodies reversibly alter memory and the CASPR2 protein complex
Annals of Neurology
Annals of Neurology
Novel Non-Invasive Quantification and Imaging of Eumelanin and DHICA Subunit in Skin Lesions by Raman Spectroscopy and MCR Algorithm: Improving Dysplastic Nevi Diagnosis
Cancers 14, 4, 1056 (2022)
Cancers 14, 4, 1056 (2022)
Constitutive Activation of p62/Sequestosome-1-Mediated Proteaphagy Regulates Proteolysis and Impairs Cell Death in Bortezomib-Resistant Mantle Cell Lymphoma
Cancers 14, 4, 923 (2022)
Cancers 14, 4, 923 (2022)
Modular multimodal platform for classical and high throughput light sheet microscopy
Sci Rep 12, 1969 (2022)
Sci Rep 12, 1969 (2022)
