Plataforma de citometría de flujo
GINYS-IDIBELL-005
José Miguel Andrés Vaquero
Cap de plataforma
Nuestra plataforma de citometría de flujo proporciona a los usuarios equipamiento de última generación para los análisis de citometría de flujo y la clasificación de células en alta velocidad. El personal de la unidad apoya a los usuarios en el diseño experimental, el análisis y la adquisición de datos.
Siguiendo las instrucciones del fabricante, los equipos se someten rutinariamente a un mantenimiento adecuado y se llevan a cabo procedimientos de control de calidad estándar para garantizar los mejores resultados.
Servicios
Servicios:
- Adquisición de muestras en el analizador, ya sea con soporte técnico o sin él, después de recibir una formación adecuada.
- Clasificación celular con soporte técnico.
- Soporte para el análisis de datos si es necesario.
El objetivo de la Unidad de Citometría es prepararse y centrarse en las aplicaciones de interés de nuestros usuarios. Les aplicaciones más comunes que se ejecutan habitualmente son:
Clasificación celular:
- En el modo de purificación (cuando lo más importante es obtener una alta pureza de la población celular de interés de la muestra original). Hasta 4 poblaciones de células al mismo tiempo (clasificación de 4 vías).
- En modo enriquecido (cuando lo más importante es obtener una alta recuperación de la población celular de interés de la muestra original). De modo que la pureza se ve ligeramente comprometida. También disponible en clasificación de 4 direcciones.
- En deposición de una sola célula (para obtener una sola célula o cualquier número deseado de células dentro de un solo pocillo utilizando cualquiera de las placas estándar de múltiples orificios).
- En modo mixto (el modo de purificación y enriquecimiento se ejecutan simultáneamente incluso para 2 poblaciones de células a la vez).
Análisis:
- Caracterización por inmunofenotipado multicolor.
- Ensayos de viabilidad.
- Ensayos de ciclo celular y proliferación.
- Expresión génica (análisis de proteínas fluorescentes).
- Etc …
Equipos
La unidad está equipada con 3 citómetros de flujo de la compañía Beckman Coulter:
- 1x clasificador de células de alta velocidad Moflo-XDP: 4 láseres (B-R-V-Y), 11 colores (5 + 2 + 2 + 2) o (5 + 2 + 4)
- Analizadores 2x Galios: 3 láseres (B-R-V), 10 colores (5 + 3 + 2).
Abreviaturas de láser y configuración del banco óptico:
Láseres:
V: violeta, 405 nm; B: azul, 488 nm; Y: amarillo, 561 nm; R: rojo, 635 nm.
Configuración de banco óptico:
10C [2 + 5 + 3] = 10 colores o detectores PMT en total y [número de ellos vinculados a una línea láser específica).
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Publicaciones
Molecular markers of putative spermatogonial stem cells in the domestic cat
Reprod Domest Anim Nov6
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Cell Rep 17(3):671-683.
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Hum Mol Genet 22 (4): 633-45. Epub 2012 Oct 31.
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Nat Protoc 8(4): 800-9.
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J Cell Sci 126 (Pt 22):5116-31. Epub 2013 Sep 17.
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AnnaFrances8/JOIN-Software-v1: Microscopy image processing program. (Version v1).
Anna Francès-Abellán. (2023). AnnaFrances8/JOIN-Software-v1: Microscopy image processing program. (Version v1). Zenodo. https://doi.org/10.5281/zenodo.8370192
Anna Francès-Abellán. (2023). AnnaFrances8/JOIN-Software-v1: Microscopy image processing program. (Version v1). Zenodo. https://doi.org/10.5281/zenodo.8370192