Genòmica funcional

GINYS-IRB-006
Dr. Freddy Miguel De Oliveira Monteiro
CORE FACILITY MANAGER
La Functional Genomics Core Facility (FGCF) de l'Institut de Recerca en Biomedicina (IRB Barcelona) ofereix un suport integral per a projectes de genòmica i transcriptòmica de teixits i cèl·lules. La nostra instal·lació dóna suport a tota la comunitat investigadora de l'IRB Barcelona, ​​però també a altres científics i grups del món acadèmic i de la indústria. Oferim solucions a mida per a una àmplia gamma de projectes, inclosos aquells amb quantitats de mostre molt limitades, o mostres amb qualitat compromesa. També oferim a tots els investigadors interessats solucions de genòmica, transcriptòmica, i epigenòmica de cèl·lula única,  en particular els que requereixen la tecnologia de microfluídica 10X Genomics. La FGCF pot donar suport als projectes següents:
  • Transcriptòmica de teixits o cultius cel·lulars (mRNA-seq, miRNA-seq, sRNA-seq i lncRNA-seq).
  • Seqüenciació d'ARN missatger i multiòmica de cèl·lules úniques mitjançant tecnologia 10X Genomics.
  • Seqüenciació del genoma sencer (WGS).
  • Immunoprecipitació i seqüenciació de la cromatina (ChIP-seq).
  • Immunoprecipitació i seqüenciació d'ARN (RIP-seq).
  • Captura de conformació cromosòmica d'alt rendiment (Hi-C/3C-Seq).
  • Seqüenciació d'amplicons i captura de regions d'interés.
  • Perfil genòmic i transcriptòmic per complementar cribratge de fàrmacs, o la validacions i descobriment de biomarcadors.
  • Anàlisi de precisió d'edicions CRISPR.
  • Validació funcional de les edicions del genoma amb RNA-seq, scRNA-seq, ChIP-seq, qPCR, etc.

Serveis

L’FGCF ofereix serveis interns d’expressió i anàlisi de mutacions a tot el genoma a investigadors d’instituts públics i empreses privades. Estem ubicats a la sala S1C14 de l’edifici del ‘Clúster I’ del Parc Científic de Barcelona. Si esteu interessats en una solució personalitzada que no s’inclou a continuació, poseu-vos en contacte amb nosaltres a genomics@irbbarcelona.org. Esperem conèixer els vostres projectes i treballar colze a colze amb vosaltres per superar qualsevol repte experimental.
  • Assessorament i Disseny Experimental: Comenteu el vostre projecte amb nosaltres i rebeu informació sobre els requisits de mostra i recomanacions per al vostre disseny experimental. Aquesta cita és opcional però molt recomanable.
  • Control de qualitat dels àcids nucleics, biblioteques i cèl·lules extretes: totes les vostres mostres seran sotmeses a control de qualitat abans del processament, garantint així les biblioteques NGS de la màxima qualitat. Utilitzem instruments Nanodrop, Qubit, Bioanalyzer i Countess per determinar la concentració, la qualitat de la mostra i la viabilitat cel·lular.
  • Extracció i purificació d’àcids nucleics: havent donat suport a milers de projectes diferents, som conscients dels nombrosos reptes relacionats amb la recollida de mostres d’ADN i ARN d’alta qualitat. El nostre conjunt d’eines inclou mètodes rendibles i altament eficaços per a l’extracció d’ARN i l’amplificació d’ADNc a partir de 100 cèl·lules o fins i tot a partir d’un sol oòcit.
  • Transcriptòmica i multiòmica d’una sola cèl·lula: l’abril de 2021, la nostra instal·lació va desplegar amb èxit les capacitats completes d’una cèl·lula 10X Genomics. En aquest sentit, oferim:
    Anàlisi de l’expressió gènica unicel·lular.
    Monocel·lular ATAC-seq. Mutioma monocel·lular (secRNA-seq + ATAC-seq simultània).
    Perfil immune unicel·lular.
    Expressió gènica dirigida.
    El controlador 10X Genomics Chromium pot capturar de 100 a 10.000 cèl·lules per mostra i processar fins a vuit mostres simultànies. Abans de posar en marxa el vostre projecte, podeu proporcionar-nos les vostres suspensions unicel·lulars. En només 10 minuts, obtindreu un control de qualitat cel·lular que us informarà del vostre flux de treball de processament cel·lular i/o de dissociació de teixits. El nostre equip l’ajudarà amb tots els passos necessaris per millorar la preparació de la mostra, obtenir un pressupost de servei i programar una cita per a la presentació de la mostra.
  • Preparació de biblioteques per a la seqüenciació de nova generació (NGS) d’Illumina: fem servir procediments totalment validats i acceptats per tota la comunitat per a la preparació de biblioteques, garantint així resultats coherents i fiables. No obstant això, sempre que sigui necessari, alinearem els nostres procediments operatius amb les necessitats específiques del vostre projecte.
    Seqüenciació d’ARNm, lncRNA, miRNA i sRNA (ARN-seq): el perfil de transcriptoma sencer mitjançant tecnologies NGS proporciona una lectura completa de l’abundància de transcripcions, la diversitat d’isoformes, així com el descobriment de noves transcripcions i gens de fusió. El nostre personal experimentat us ajudarà amb requisits de mostra, fluxos de treball i estratègies de seqüenciació per assolir els objectius del vostre projecte.
    Seqüenciació del genoma sencer (WGS): la seqüenciació del genoma complet d’un individu permet la identificació de variants d’ADN somàtic o germinal.
    ChIP-seq i RIP-seq: aquests enfocaments combinen la immunoprecipitació de la cromatina (ChIP) o ARN (RIP) amb NGS per identificar els llocs d’unió proteïna-ADN o proteïna-ARN de manera a tot el genoma. En els últims anys, la FGCF ha donat suport a desenes de projectes ChIP-seq i RIP-seq. T’ajudarem mitjançant procediments d’enllaç, extracció i fragmentació per garantir que s’obtinguin biblioteques de màxima qualitat.
    Hi-C: la FGCF ha implementat un flux de treball per a la captura i seqüenciació de conformació cromosòmica que permet als investigadors mapejar l’organització espacial de l’ADN genòmic dins dels nuclis cel·lulars i identificar les interaccions conformacionals entre regions no adjacents.
    ATAC-seq: en aquest cas, l’accessibilitat de la cromatina a tot el genoma s’interroga mitjançant l’accessibilitat de la transposasa per descobrir l’extensió i la identitat de les regions propenses a interactuar amb factors de transcripció en càncer i altres patologies.
    Seqüenciació dirigida: tot i que els experiments WGS poden ser la vostra opció preferida, els seus costos encara poden ser prohibitius. Els enfocaments orientats centren el rendiment, i per tant el cost, en subconjunts definits de regions genòmiques, permetent així majors profunditats de seqüenciació per a la detecció de variants segura a preus més baixos.
  • Seqüenciació d’amplicons: l’amplificació per PCR de regions específiques d’interès redueix l’espai genòmic objectiu. Hi ha diversos mètodes disponibles per a un disseny de panell complet i acurat, la qual cosa us permet multiplexar centenars o milers d’amplicons en una sola reacció. No dubteu a posar-vos en contacte per obtenir un disseny i pressupost personalitzats.
  • Captura d’objectius, o captura i enriquiment de seqüències: aquesta estratègia alternativa redueix l’espai genòmic seqüenciat “captant” regions d’interès amb sondes biotinilades personalitzades. La seqüenciació de l’exoma sencer és l’aplicació Target Capture més estesa. El nostre personal té una àmplia experiència dissenyant sondes per a la captura d’objectius i estarà encantat d’ajudar-vos amb el vostre projecte.
  • Pico Profiling: aquesta tècnica, pionera pel FGCF, facilita la generació de grans quantitats d’ADNc saturat a partir de poblacions cel·lulars molt petites. El nostre equip té experiència aïllar l’ARN i amplificar l’ADNc de tan sols 40 cèl·lules classificades per organoides de tumor de ratolí (MTO) o d’un sol oòcit.
  • Microarrays: mostra de resultats de l’anàlisi de l’expressió gènica del genoma sencer per a una gran varietat d’organismes experimentals mitjançant matrius Genechip.
    Metilació de l’ADN: l’anàlisi de múltiples loci per a la metilació de l’ADN encara es realitza en una fase experimental. Per a projectes específics sobre metilació de l’ADN, poseu-vos en contacte amb nosaltres.
  • qPCR: un QuantStudio 6 Pro està disponible per reservar. Les sortides han de començar dins de l’horari laboral de la instal·lació.
  • Col·leccions de clons: la FGCF té prop de 200.000 clons per a les vostres necessitats de genètica inversa, incloent:
  • shRNA humans i de ratolí: la llista completa de clons d’shRNA està disponible en aquest fitxer zip. La informació detallada sobre els clons TRC1 està disponible al lloc web de la biblioteca shRNA de Sigma MISSION i al Consorci RNAi (TRC) amb seu al Broad Institute.
  • Clons ORF humans: la llista de clons ORF està disponible en aquest fitxer zip. Les seqüències de la majoria de clons d’aquesta col·lecció (edició v1.1) es poden recuperar de la base de dades hORFeome v7.1 del Harvard Center for Cancer Systems Biology.

Equipament

Personal

Technical Officer
David Fernández | david.fernandez@irbbarcelona.org | 934039803
Senior Research Officer
Dr. José Ignacio Pons | nacho.pons@irbbarcelona.org | 934039803
CORE FACILITY MANAGER
Dr. Freddy Miguel De Oliveira Monteiro | freddy.monteiro@irbbarcelona.org | 934 034 550 | ORCID | Pàgina PRC

Publicacions

Repression of endogenous retroviruses prevents antiviral immune response and is required for mammary gland development
Alexandra Avgustinova, Carmelo Laudanna, Mónica Pascual-García, Quirze Rovira, Magdolna Djurec, Andres Castellanos, Uxue Urdiroz-Urricelqui, Domenica Marchese, Neus Prats, Alexandra Van Keymeulen, Holger Heyn, Juan M. Vaquerizas, Salvador Aznar Benitah
Cell Stem Cell
Narrow mutational signatures drive acquisition of multidrug resistance in the fungal pathogen Candida glabrata
Ewa Ksiezopolska, Miquel Àngel Schikora-Tamarit, Reinhard Beyer, Juan Carlos Nunez-Rodriguez, Christoph Schüller, Toni Gabaldón
Current Biology
Dietary palmitic acid promotes a prometastatic memory via Schwann cells
Pascual G, Domínguez D, Elosúa-Bayes M, Beckedorff F, Laudanna C, Bigas C, Douillet D, Greco C, Symeonidi A, Hernández I, Gil SR, Prats N, Bescós C, Shiekhattar R, Amit M, Heyn H, Shilatifard A, Benitah SA
Nature
The RNA binding protein CPEB2 regulates hormone sensing in mammary gland development and luminal breast cancer
Rosa Pascual, Judit Martín, Fernando Salvador, Oscar Reina, Veronica Chanes, Alba Millanes-Romero, Clara Suñer, Gonzalo Fernández-Miranda, Anna Bartomeu, Yi-Shuian Huang, Roger R Gomis, Raúl Méndez
Science Advances
A Species-Wide Inventory of NLR Genes and Alleles in Arabidopsis thaliana
Anna-Lena Van de Weyer, Freddy Monteiro, Oliver J Furzer, Marc T Nishimura, Volkan Cevik, Kamil Witek, Jonathan D G Jones, Jeffery L Dangl, Detlef Weigel, Felix Bemm
Cell

CENTRE

IRB Barcelona - Institut de Recerca Biomèdica

Parc Científic de Barcelona
Baldiri Reixac, 10

08028 Barcelona http://www.irbbarcelona.org/ca

ÀMBITS RIS3CAT

  • Sistema educatiu i de generació de coneixement
  • Sistema industrial
  • Sistema sociosanitari

CATEGORIES

  • EQUIPAMENT TECNOLÒGIC
    • Genòmica
    • Seqüenciació

TARIFES I ACCÉS

Nivell de Disponibilitat: Mitja
Procediment d’accès:
Obert
CERCA - Ginys